EXTRACCIÓ DNA

El mètode d’extracció d’DNA que utilitza el salting-out es basa en la capacitat de les sals per precipitar la proteïna i altres contaminants cel·lulars, deixant el DNA en solució aquosa. En aquest procés s’utilitzen dues solucions: una solució de lisi que trenca les cèl·lules mostrals, alliberant el DNA i una solució de precipitació que conté altes concentracions de sals.

En l’extracció del DNA de saliva amb el mètode del salting-out, s’utilitza una solució de lisi que conté detergent i proteasa, que ajuda a desnaturalitzar les proteïnes i trencar les cèl·lules de saliva per alliberar el DNA. Posteriorment, s’afegeix una solució de sal, que provoca la precipitació de proteïnes i altres components cel·lulars no desitjats de la mostra.

La sal utilitzada en la solució de precipitació és generalment clorur de sodi (NaCl), tot i que també es poden utilitzar altres sals com el sulfat d’amoni o el fosfat de sodi. Afegint sal, proteïnes i altres contaminants, s’uneixen a la sal en la solució, formant un complex insoluble que es separa per centrifugació.

Un cop eliminada la majoria de proteïnes i altres contaminants, es fa una extracció amb etanol, cosa que provoca la precipitació del DNA en solució aquosa. El DNA es pot recollir per centrifugació i rentat d’etanol per eliminar qualsevol residu de sal o proteïna.

En resum, el mètode d’extracció del DNA amb salting-out és una tècnica eficaç per separar el DNA de les proteïnes i altres contaminants cel·lulars presents en una mostra de saliva. La precipitació dels contaminants per les sals i la col·lecció posterior del DNA en solució aquosa permeten obtenir una mostra purificada de DNA que es pot utilitzar per a aplicacions moleculars com la PCR, la seqüenciació d’ADN, entre d’altres.