FONAMENT

PCR

La PCR és una tècnica utilitzada en biologia molecular que permet aconseguir una gran quantitat de còpies d‟un fragment de DNA, partint d‟una quantitat ínfima d‟aquesta biomolècula. Aquesta tècnica va ser dissenyada tal com la coneixem pels bioquímics Kary Banks Mullis i Michael Smith a la dècada dels 90, que van aconseguir patentar-la.

És un mètode molt sensible i es requereixen volums molt petits per a reaccions individuals.
Es recomana preparar una mestra mestra (master mix) per a diverses reaccions. La màster mix s’ha de barrejar bé i després dividir-se pel nombre de reaccions, assegurant-se que cada reacció contingui la mateixa quantitat d’enzim, dNTP i primers.

La PCR es basa en una activitat enzimàtica que succeeix de forma normal a les cèl·lules del nostre organisme. A les cèl·lules, les DNA polimerases són capaces de replicar el DNA nuclear, per obtenir dues còpies idèntiques, que després seran repartides a les cèl·lules filles a la mitosi. Bé, doncs, de la mateixa manera, a la PCR les polimerases seran capaces de replicar, com a fotocopiadora, un fragment de DNA, en diversos cicles, per obtenir una gran quantitat de còpies igualetes a ella.